猪流行性腹泻病毒(PEDV)是一种肠道冠状病毒,主要引起新生仔猪呕吐、腹泻、脱水和死亡,给世界养猪业造成了巨大的经济损失。疫苗免疫是防控PED最有效的手段,目前用于防控该病的疫苗有弱毒疫苗和灭活疫苗。将强毒株在细胞上进行连续传代是获得PEDV弱毒疫苗候选毒株的常用方法,但此方法工作量大,费时费力,且毒力容易返强。因此,对病毒毒力基因进行鉴定,可以深入理解病毒致病机制,并能够为安全高效弱毒疫苗的研制奠定重要的基础。
近日,江苏省农业科学院兽医所所长李彬研究员团队在PEDV毒力基因鉴定和新型弱毒疫苗研究方向取得重要进展,研究成果以题为“Genetic signatures associated with the virulence of porcine epidemic diarrhea virus AH2012/12”在线发表于病毒学领域国际权威期刊《Journal of Virology》。该研究发现了PEDV毒株新的毒力基因区域,为新的弱毒疫苗研制奠定了重要基础。
本研究将分离的PEDV毒株AH2012/12进行体外连续传代至102代(AH2012/12-P102),通过仔猪攻毒试验证明,AH2012/12-P102不引起仔猪发病,表明其致病性显著降低。基因组序列分析发现,与AH2012/12亲本毒株相比,AH2012/12-P102在S基因存在两处氨基酸缺失,分别位于S基因的 nt 164 – 169和 nt 4139 – 4190处。研究人员利用病毒反向遗传学平台构建了对应的重组病毒,明确了病毒稳定的生物学特性,进一步通过动物攻毒试验证实了S基因的nt 4139 – 4190缺失使AH2012/12毒株的毒力降低,证明该区域是PEDV重要的毒力相关基因。
图1 重组病毒的构建及对仔猪的致病性
该团队将S基因nt 4139 – 4190缺失毒株制备成新型弱毒疫苗,通过免疫效力试验发现,新的弱毒疫苗比传统灭活疫苗能够诱导更高的中和抗体、IgG和IgA抗体水平。仔猪攻毒试验证明新型弱毒疫苗能够对仔猪提供良好的免疫保护。总之,本研究鉴定出PEDV新的毒力基因,设计开发出安全高效弱毒疫苗候选毒株,为PED防控提供了重要的理论基础和产品支撑。
江苏省农业科学院兽医所动物腹泻病防控创新团队首席李彬研究员为论文通讯作者,博士后彭棋(现为江西农业大学青年教授),江苏省微生物学会青委会委员、动物腹泻病防控创新团队助理范宝超副研究员和宋旭博士生为论文共同第一作者,该研究得到十四五国家重点研发计划,国家自然科学基金和中国博士后科学基金等项目的资助。
|